-
区域特异性诱变
原理可在长达3‘的克隆化DNA片段上产生大量的随机分布的核苷酸替换突变，在将DNA克隆到一个可用来分离单链DNA的载体后，用各种可造成特定碱基损伤的化学试剂处理
2024-06-08 34 -
定点诱变实验（利用PCR引物点突变）
材料与仪器DNADNA聚合酶 klenow 限制性内切酶水浴锅 离心机 培养箱步骤1. 制备模板（见基本方案，步骤1和2） 2. 合成和纯化寡核苷酸引物并对
2024-06-08 33 -
定点诱变实验基本实验
材料与仪器DNATE 寡核苷酸引物 质粒 dNTP DNA聚合酶 氯仿 石蜡油 无水乙醇离心管 热循环仪 离心机步骤1. 利用突变区两侧的限制性内切酶位点将待
2024-06-08 37 -
磷酸钙介导的真核细胞转染实验（高效转染法）
材料与仪器真核细胞完全培养液 TE BES培养箱 平板步骤1. 转染前一天接种呈指数生长的细胞，密度为5105/10 cm 平板。加10 ml 完全培养液，
2024-06-08 36 -
磷酸钙介导的真核细胞转染实验（磷酸钙法）
材料与仪器真核细胞CaCl2 HEPES缓冲液 氯化铯 PBS培养箱 锥形管 离心管步骤1. 在转染前一天将细胞分入10 cm 组织培养平板中。当被转染的细胞
2024-06-08 29 -
植物原生质体细胞
材料与仪器原生质体细胞电穿孔缓冲液 原生质溶液尼龙筛网 锥形管步骤1. 将小心切成5 mm 的条状无菌植物材料8 ml 原生质体溶液中温育，置于30℃旋转摇床
2024-06-08 32 -
电穿孔转染哺乳动物细胞
材料与仪器哺乳动物细胞完全培养液 电穿孔缓冲液电穿孔仪器 电击池步骤1. 在完全培养液中培养特转染细胞至对数生长晚期，4℃ 640 g 离心5 min，收集细
2024-06-08 39 -
哺乳动物细胞的选择标记
材料与仪器哺乳动物步骤一、腺苷脱氨酶（ADA） 1. 选择条件：培养液中加10 μg/ml 胸腺嘧啶脱氧核苷，15 μg/ml 次黄嘌呤，4 μmol/l 腺
2024-06-08 38 -
脂质体进行稳定转染
材料与仪器哺乳动物细胞DMEM培养箱 离心管步骤1. 接种细胞（见“脂质体介导短暂表达”步骤1）长至50%汇片。 2. 制备DNA/脂质体混合物，转染细胞（
2024-06-08 33 -
脂质体介导短暂表达
材料与仪器哺乳动物细胞质粒DNA 完全培养基 氯化铯 DMEM培养皿 培养箱 聚苯乙烯管步骤1. 按5105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞，在37
2024-06-08 32 -
哺乳动物细胞基因稳定转染的实验基本方案
材料与仪器哺乳动物细胞完全培养液培养箱 离心管步骤1. 确定所要转染的细抱系能呈独立集落生长。对于贴壁细胞，在10 cm 组织培养培养皿中接种约100个细胞，
2024-06-08 38 -
报道基因活性的同位素分析实验（人生长激素的放射免疫分析法）
材料与仪器hGH表达质粒洗涤液 亲和素包被珠试管 γ计数仪步骤1. 取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。2. 加100 μl
2024-06-08 35 -
报道基因活性的同位素分析实验（CAT活性的相-抽提分析法）
材料与仪器转染细胞氯霉素 Tris·Cl TMPD 二甲苯离心机 离心管 培养箱步骤一、来源于哺乳动物细胞1. 按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻
2024-06-08 35 -
报道基因活性的同位素分析实验（原位裂解细胞的CAT分析法）
材料与仪器转染细胞Triton裂解液培养皿 培养箱步骤1. 60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞，用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低
2024-06-08 37 -
报道基因活性的同位素分析实验（CAT活性的层析分析法）
材料与仪器DNAPBS 乙酸乙酯 氯仿 甲醇 Tris·Cl薄层层析缸 滤纸 离心管 离心机步骤1. 100 mm 培养皿中的转染了CAT表达质粒的贴壁细胞，
2024-06-08 39
