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非同位素分析报道基因活性实验（β-半乳糖苷酶报道基因的化学发光分析）
材料与仪器转染的细胞PBS Triton裂解液 β-半乳糖苷酶反应缓冲液 光发射加速液细胞刮子 绘图仪 发光计 计数器步骤1. 用PBS分别洗涤两次60 mm
2024-06-08 38 -
非同位素分析报道基因活性实验（冻融裂解的细胞的荧光素酶分析）
材料与仪器哺乳动物细胞PBS培养皿 细胞刮子 离心机步骤1. 用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。 2. 每只培养皿中加1 m
2024-06-08 33 -
非同位素分析报道基因活性实验（萤火虫荧光素酶法）
材料与仪器转染细胞PBS 荧光素贮液 Triton 甘氨酰甘氨酸橡胶细胞刮子 绘图仪 比色杯步骤1. 用冰冷的PBS洗涤在3个60 mm 培养皿中的转染了荧
2024-06-08 34 -
反转录病毒产毒细胞系建立实验（培养细胞的Xgal染色）
材料与仪器转染细胞PBS 戊二醛 低聚甲醛 Xgal溶液培养箱 离心机步骤1. 弃培荞上清并加固定液，室温下，在通风橱中与2%低聚甲醛共育60 min，或与0
2024-06-08 35 -
反转录病毒产毒细胞系建立实验（测定病毒滴度）
材料与仪器病毒原液G418离心机 培养箱步骤1. 感染的前1天按1：10至1：20将靶细胞NIH 3T3分传于6 cm 培养皿中。 2. 进行感染的当天，移
2024-06-08 33 -
反转录病毒载体导入包装细胞系
材料与仪器包装细胞系HEPES CaCl2 甘油 DMSO培养皿 培养板 离心机步骤1. 在转染前1天，在10 cm 培养皿中接种包装细胞，接种密度大约相当于
2024-06-08 35 -
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验（聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒）
材料与仪器病毒PEG NTE转子 离心机步骤1. 制备病毒原液。加5 mol/l NaCl至病毒原液中，4℃不断搅拌，至终浓度达到0.4 mol/l。2.
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大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验（离心法）
材料与仪器病毒细胞小牛血清滤器 转子步骤1. 将产病毒细胞按1：10或1：20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中，培养细胞至50%~90
2024-06-08 38 -
反转录病毒原液检测实验（在Tris-Tricine缓冲系统中电泳）
材料与仪器蛋白质Tricine样品缓冲液 考马斯亮蓝染色液 乙酸电泳仪 离心机步骤1. 按“Laemmli凝胶电泳法”的步骤1~7，配制溶液并灌制分离胶和积层
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反转录病毒原液检测实验（反转录酶分析法）
材料与仪器病毒SSC 乙醇滴定板 滤纸 离心机步骤1. 加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒
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反转录病毒原液检测实验（通过药物抗性的水平传播分析）
材料与仪器病毒细胞polybrene 小牛血清 DMEM培养皿 滤膜步骤1. 在开始分析的前1天，按1：50将NIH 3T3细胞分传于3个6 cm 培养皿中。
2024-06-08 33 -
克隆化基因的体外转录和翻译实验基本方案
材料与仪器DNATE 核苷三磷酸混合液 RNA聚合酶缓冲液 异丁醇 NaOH TCA离心机 摇床步骤1. 亚克隆编码蛋白质的目的DNA片段于质粒载体的SP6或
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辅助方案（细胞核提取方法的优化）
材料与仪器细胞核KCl 高盐缓冲液透析膜 离心机步骤1. 按基本方案中歩骤1~7操作。 2. 将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌，按如下方法在每份悬液
2024-06-08 46 -
核提取物的制备
原理通过向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后，可以降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，是物理变化，可复原。对于特定的蛋白质，影响
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酶切片断的脱磷实验基本方案
材料与仪器DNA片段碱性磷酸酶 酚 氯仿 EDTA SDS TE缓冲液 电泳缓冲液 NH4AC离心机 恒温设备 真空干燥机 取液器步骤1. 在实验四所得DNA
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