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总 RNA 提取实验(试剂盒快速提取法)
原理一些公司推出的总RNA 提取试剂盒,可以用来制备高质量的可用于建库的RNA 。该总RNA 纯化系统采用两种著名的RNA 酶抑制剂,异硫氰酸弧(GTC)和β-
2024-06-14 64 -
shRNA设计
材料与仪器【材料】靶细胞,载体步骤1. 克隆到shRNA表达载体中的shRNA包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔的,组成发夹结构,由pol
2024-06-14 54 -
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
原理一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。材料与仪器N-表达质粒 E.coil N567 感受态细菌储存液 缓冲
2024-06-14 65 -
补骨脂素介导的光交联反应研究RNA与蛋白质分子间的作用实验
材料与仪器蛋白酶K变性胶电泳缓冲液 非变性胶电泳缓冲液 结合缓冲液 水解缓冲液 丙烯酰胺储存液 RNA 洗脱缓冲液四甲基乙二胺 过硫酸铵 AMV 反转录酶及反应
2024-06-14 63 -
利用大肠杆菌系统检测RNA与RNA结合蛋白的相互作用实验
原理大肠杆菌中异源性的 RNA-BP 与靶 RNA 的结合会抑制靶基因的翻译。此方法已成功地应用于包括 HIV Rcv 蛋白和核仁素(nucleolin)在内的
2024-06-14 61 -
核酸分子液相杂交实验(通过引物延伸分析法进行液相杂交)
简介引物延伸分析法(primer extension analysis)可用于 RNA5'-端的定位和定量,并可检测 mRNA 的前体和剪接加工中间体。采用引物
2024-06-14 78 -
核酸分子液相杂交实验(通过RNA酶保护分析法进行液相杂交)
简介RNA 酶保护分析法(RNase protection assay, RPA)的原理与核酸酶 S1 保护分析法基本相同,只是所采用的探针为单链 RNA 探针
2024-06-13 78 -
核酸分子液相杂交实验(通过核酸酶 S1 保护分析法进行液相杂交)
简介核酸酶 S1 保护分析法(nuclease S1 protection assay)是一种检测 RNA 的杂交技术,又称为 S1-描图(S1-mapping
2024-06-13 76 -
Northern 印迹技术
简介印迹杂交是指将待测核酸片段结合到一定的固相支持物上,然后与存在于液相中的标记探针进行杂交的过程。Northern 印迹技术(Northern blot)是分
2024-06-13 87 -
RNA提取
原理Trizol 是一种单相溶液,由苯酚和异硫氰酸胍等组成。通过加入Trizol,能破坏细胞和溶解细胞成分,利用氯仿的萃取得到上层水相(含 RNA)、界面层和下
2024-06-13 62 -
培养细胞中RNA提取及检测
简介RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,
2024-06-13 67 -
组织块中RNA提取及检测
简介RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,
2024-06-13 59 -
RNA 干扰技术
简介转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing,PTGS)被称为RNA干扰(RNAi),与mRNA对应的正义RN
2024-06-13 62 -
荧光原位杂交实验基本方案
材料与仪器样品DNA探针 非同位素 甲酰胺 杂交混合液 甲酰胺 Triton X-100 SSC相差显微镜 盖玻片 水浴锅 加湿盒 滤光片 荧光显微镜步骤1a.
2024-06-13 73 -
荧光原位杂交实验(荧光原位杂交技术)
原理用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴
2024-06-13 63