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Southern 印迹实验（印迹法）
原理本方案是专门为将琼脂糖凝胶印迹至不带电荷或带正电荷的尼龙膜上而设计的，稍作修改后同样可用于硝酸纤维素膜方法。材料与仪器DNAHCl NaCl Tris Na
2024-06-13 66 -
生物素酰化探针的制备实验（随即寡核苷酸引物合成法）
材料与仪器DNAdNTP 生物素 klenow酶 TE EDTA LiCl 乙醇离心机 培养箱步骤1. 在1. 5 ml 离心管中加入500 ng~2 μg
2024-06-13 60 -
生物素酰化探针的制备实验（切口平移法）
材料与仪器DNADNA聚合酶 dNTP 2-疏基乙醇 生物素 甘油 NaCl EDTA SDS 无水乙醇注射器 电泳仪 离心机 培养箱步骤1. 混合以下物质于
2024-06-13 58 -
生物素酰化探针的检测实验（化学发光法）
材料与仪器DNA生物素 磷酸酶紫外灯 离心机步骤1. 用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上，样品面朝上，放进温箱内12~80℃放15~30 mi
2024-06-13 67 -
生物素酰化探针的检测实验（比色法）
材料与仪器DNA磷酸酶缓冲液 封阻液 牛血清蛋白 TE NBT离心机 分光光度计 摇床步骤1. 用DNA稀释缓冲液，稀释生物素酰化标准DNA，浓度为0、1、2
2024-06-13 60 -
地高辛标记探针的化学发光检测实验（化学发光法）
材料与仪器DNA抗体步骤1. 用地髙辛标记探针与带DNA或RNA印迹的正电荷尼龙膜杂交。 2. 根据厂商的推荐条件，封闭和结合抗体。3. 对X光片曝光约2
2024-06-13 54 -
噬菌体文库的扩增实验基本方案
材料与仪器噬菌体MgSO4 麦芽糖 琼脂糖 氯仿 DMSO SM离心机 分光光度计 水浴锅步骤1. 制备铺平板菌（1）2.5 ml 新鲜过夜培养的宿主菌液接种
2024-06-13 65 -
粘粒和质粒文库的扩增实验基本方案
材料与仪器质粒LB 甘油硝酸纤维素膜 培养箱步骤1. 在含抗生素的平板上加一层硝酸纤维素膜，将抗药性细菌铺在硝酸纤维素膜上，培养细菌至菌落边缘正好相接。2.
2024-06-13 73 -
噬菌体文库的铺平板和转移实验基本方案
材料与仪器噬菌体琼脂糖 LB NaOH SSC Tris·Cl硝酸纤维素膜 培养箱步骤1. 通过系列等比稀释滴定噬菌体文库的滴度。 2. 重组噬菌体与铺平板
2024-06-13 67 -
粘粒及质粒文库的铺平板和转移实验基本方案
材料与仪器质粒LB NaOH 氯霉素 Tris·Cl NaCl硝酸纤维素滤膜 离心机 布氏漏斗 培养箱步骤1. 在含抗生素的平板上，通过系列等比稀释确定质粒和
2024-06-13 73 -
使用合成核苷酸作探针实验（在绿化四甲胺中（TMAC）杂交）
材料与仪器寡核苷酸LB SDS EDTA TMAC水浴锅 离心机 培养箱 尼龙膜步骤1. 按“在氯化钠/柠檬酸钠中杂交”介绍的方法处理已影印细菌菌落的滤膜。2
2024-06-13 60 -
使用合成核苷酸作探针实验（在氯化钠/柠檬酸钠中杂交）
材料与仪器核苷酸SSC 焦磷酸钠 SDS培养箱 水浴锅步骤1. 制备双份的转印细菌菌落或噬斑的硝酸纤维素滤膜（处理和干烤过）。2. 在室温下用3 SDS
2024-06-08 62 -
噬菌体克隆的纯化实验基本方案
材料与仪器噬菌体LB 顶层琼脂糖 氯仿 SM MgSO4培养箱 牙签 硝酸纤维素膜步骤1. 在直径82 mm LB平极上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml
2024-06-08 81 -
粘粒和质粒克隆的纯化实验基本方案
材料与仪器质粒LB 抗生素涂布棒 硝酸纤维滤膜步骤1. 通过原位杂交检测硝酸纤维索滤膜上影印菌落。2. 用无菌的牙签挑出阳性克隆，接种到含适当抗生素的1 m
2024-06-08 91 -
变性凝胶电泳实验（含甲酰胺的测序胶）
原理聚丙烯酰胺凝胶加人甲酰胺可以使造成条带压缩的测序产物的二级结构不稳定。材料与仪器DNA甲酰胺 甲醇 乙醇 TEMED SDS电泳仪步骤1. 按基本方案步骤
2024-06-08 69
