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脂质体介导短暂表达
材料与仪器哺乳动物细胞质粒DNA 完全培养基 氯化铯 DMEM培养皿 培养箱 聚苯乙烯管步骤1. 按5105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞，在37
2024-06-08 50 -
哺乳动物细胞基因稳定转染的实验基本方案
材料与仪器哺乳动物细胞完全培养液培养箱 离心管步骤1. 确定所要转染的细抱系能呈独立集落生长。对于贴壁细胞，在10 cm 组织培养培养皿中接种约100个细胞，
2024-06-08 80 -
报道基因活性的同位素分析实验（人生长激素的放射免疫分析法）
材料与仪器hGH表达质粒洗涤液 亲和素包被珠试管 γ计数仪步骤1. 取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。2. 加100 μl
2024-06-08 61 -
报道基因活性的同位素分析实验（CAT活性的相-抽提分析法）
材料与仪器转染细胞氯霉素 Tris·Cl TMPD 二甲苯离心机 离心管 培养箱步骤一、来源于哺乳动物细胞1. 按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻
2024-06-08 66 -
报道基因活性的同位素分析实验（原位裂解细胞的CAT分析法）
材料与仪器转染细胞Triton裂解液培养皿 培养箱步骤1. 60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞，用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低
2024-06-08 57 -
报道基因活性的同位素分析实验（CAT活性的层析分析法）
材料与仪器DNAPBS 乙酸乙酯 氯仿 甲醇 Tris·Cl薄层层析缸 滤纸 离心管 离心机步骤1. 100 mm 培养皿中的转染了CAT表达质粒的贴壁细胞，
2024-06-08 66 -
非同位素分析报道基因活性实验（β-半乳糖苷酶报道基因的化学发光分析）
材料与仪器转染的细胞PBS Triton裂解液 β-半乳糖苷酶反应缓冲液 光发射加速液细胞刮子 绘图仪 发光计 计数器步骤1. 用PBS分别洗涤两次60 mm
2024-06-08 67 -
非同位素分析报道基因活性实验（冻融裂解的细胞的荧光素酶分析）
材料与仪器哺乳动物细胞PBS培养皿 细胞刮子 离心机步骤1. 用PBS分别洗3个60 mm 培养皿中的转染了荧光素酶质粒的细胞。 2. 每只培养皿中加1 m
2024-06-08 62 -
非同位素分析报道基因活性实验（萤火虫荧光素酶法）
材料与仪器转染细胞PBS 荧光素贮液 Triton 甘氨酰甘氨酸橡胶细胞刮子 绘图仪 比色杯步骤1. 用冰冷的PBS洗涤在3个60 mm 培养皿中的转染了荧
2024-06-08 62 -
反转录病毒产毒细胞系建立实验（培养细胞的Xgal染色）
材料与仪器转染细胞PBS 戊二醛 低聚甲醛 Xgal溶液培养箱 离心机步骤1. 弃培荞上清并加固定液，室温下，在通风橱中与2%低聚甲醛共育60 min，或与0
2024-06-08 60 -
反转录病毒产毒细胞系建立实验（测定病毒滴度）
材料与仪器病毒原液G418离心机 培养箱步骤1. 感染的前1天按1：10至1：20将靶细胞NIH 3T3分传于6 cm 培养皿中。 2. 进行感染的当天，移
2024-06-08 63 -
反转录病毒载体导入包装细胞系
材料与仪器包装细胞系HEPES CaCl2 甘油 DMSO培养皿 培养板 离心机步骤1. 在转染前1天，在10 cm 培养皿中接种包装细胞，接种密度大约相当于
2024-06-08 67 -
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验（聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒）
材料与仪器病毒PEG NTE转子 离心机步骤1. 制备病毒原液。加5 mol/l NaCl至病毒原液中，4℃不断搅拌，至终浓度达到0.4 mol/l。2.
2024-06-08 78 -
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验（离心法）
材料与仪器病毒细胞小牛血清滤器 转子步骤1. 将产病毒细胞按1：10或1：20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中，培养细胞至50%~90
2024-06-08 75 -
反转录病毒原液检测实验（在Tris-Tricine缓冲系统中电泳）
材料与仪器蛋白质Tricine样品缓冲液 考马斯亮蓝染色液 乙酸电泳仪 离心机步骤1. 按“Laemmli凝胶电泳法”的步骤1~7，配制溶液并灌制分离胶和积层
2024-06-08 62
