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用于 PCR 的模板 DNA 制备实验(冰冻片)
材料与仪器步骤1. 将 10 μl 冰冻切片直接放入含组织裂解液的离心管中。2. 无菌尖头刀片刮下,放入 300~900 μl 组织裂解液中,并加入 20 mg
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直接法(DNA 免提法)
材料与仪器步骤1. 标本太少时,可将一张石蜡切片经脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 加入 20~80 μl 直接裂解液中,加 20 m
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改进的石蜡切片 DNA 提取方法
材料与仪器步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上,常规烘片,脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 无菌尖头刀
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酚-氯仿法提取石蜡组织中 DNA
材料与仪器步骤1. 10 mm 厚石蜡切片 10~15 张,置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf 管中。2. 脱蜡 二甲苯 1200 μl,9000
2024-05-25 45 -
缺口平移实验基本方案
原理缺口平移是一种将标记核苷酸掺入到DNA中的方法,这些DNA可以是孤立的DNA片段或是一个完整克隆。该方法利用两种酶的联合作用:DNA酶I在DNA链上打开缺口
2024-05-25 37 -
FISH 技术基本实验基本方案
材料与仪器70%乙醇 SSC 磷酸盐缓冲溶液(PBS) Hemo-De清理试剂 蛋白酶溶液水浴锅 增湿器 玻片步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里
2024-05-25 39 -
质粒构建技术(双酶切实验)
简介在探索基因功能的实验中,我们需要过表达目的基因以判断其发挥的功能,因此我们需要将目的基因构建到表达载体上,再将载体通过侵染或瞬时表达的方式转入植物。双酶切实
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质粒构建技术(同源重组法构建质粒)
简介质粒的构建是分子生物学研究中常用的实验技术,质粒是能够自主复制的环状 DNA 分子,将特定的基因序列插入到工程质粒中,再把质粒转化到细菌、细胞或酵母中,使质
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质粒构建技术(重组酶构建质粒)
简介基于同源基因重组原理,适用于向几乎任何载体在任何位点进行定向克隆,无需考虑插入片段自身携带的酶切位点可高效克隆 50bp~10kb 片段,同时构建时间也大大
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质粒构建技术(T4 DNA Ligase)
简介T4 DNA Ligase 即 T4 DNA 连接酶,可以催化粘端或平端双链 DNA 或 RNA 的 5’-P 末端和 3’-OH 末端之间以磷酸二酯键结合
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碱裂解法(质粒提取)
材料与仪器溶液I 50mmol/L葡萄糖 25mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 10mmol/LEDTA(pH8.0)步骤(一)细菌培养物的生长;(二
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CaCl2 法制备感受态细胞
材料与仪器【 器材 】 1 .培养皿 2 .恒温培养箱 【试剂 】 1 . LB 培养基 2 .选择性 LB 琼脂培养平板(含氨苄青霉素,终浓度为 50μg/m
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密度梯度离心法(核酸提取)
材料与仪器【试剂】比重1.0770.001的聚蔗糖-泛影葡胺(商品名为淋巴细胞分离液)。 Hank's液(无Ca2+、Mg2+) 10%小牛血清RPMI
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核酸提取薄层培养
材料与仪器【材料】组织块【试剂】PBS【仪器】培养液,培养箱步骤1. 将组织剪成1mm3左右的组织块;2. 用PBS缓冲液清洗组织块3次;3. 将组织块按照一定
2024-05-25 35 -
核酸提取法
材料与仪器【试剂】1. 蛋白酶 K(10 mg/ml),-20℃ 保存。2. TE(pH 8.0):10mmol/L Tris.Cl(pH 8.0),1 mmo
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