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  • CTAB法(植物组织制备基因组 DNA 实验)

    CTAB法(植物组织制备基因组 DNA 实验)

    原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提

    2024-05-25 36
  • 氯化铯法(植物组织制备基因组 DNA 实验)

    氯化铯法(植物组织制备基因组 DNA 实验)

    原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部, 从而达到提

    2024-05-25 34
  • 制备DNA(哺乳动物中制备基因组 DNA 实验)

    制备DNA(哺乳动物中制备基因组 DNA 实验)

    材料与仪器动物组织PBS 乙酸铵 乙醇 酚 氯仿 异戊醇 TE离心机 摇床 研钵步骤1. 切下组织并立即剪成小块,置于液氮中冻结。 2. 将200 mg~1

    2024-05-25 33
  • DNA定点突变实验

    DNA定点突变实验

    原理定点突变是指通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除

    2024-05-22 86
  • 乙醇沉淀法(沉淀 DNA 的实验)

    乙醇沉淀法(沉淀 DNA 的实验)

    原理DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合

    2024-05-22 72
  • 多样抽滤法(DNA 斑点和狭线印迹实验)

    多样抽滤法(DNA 斑点和狭线印迹实验)

    原理斑点和狭线印迹是一种将混合的未经分离的面定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交分析的技术。材料与仪器DNASSC NaCl NaOH Tris·Cl紫外透射仪

    2024-05-22 28
  • DNA琼脂糖核酸电泳

    DNA琼脂糖核酸电泳

    原理带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所不可或缺的组成部分。核酸电泳通常 在琼脂糖凝

    2024-05-22 47
  • 放射标记法(DNA 印迹杂交分析实验)

    放射标记法(DNA 印迹杂交分析实验)

    原理本方案适合于用100~1 000 bp 长的放射性标记的DNA探针对Southern转印、斑点及狭线印迹进行杂交分析。 材料与仪器DNASDS SSC水浴锅

    2024-05-22 62
  • 限制酶部分消化

    限制酶部分消化

    材料与仪器DNA限制酶缓冲液电泳仪步骤1. 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DNA。2. 用32P末端标记消化产物,5’末端可先用小牛肠碱性磷酸酶

    2024-05-22 35
  • 多种酶消化

    多种酶消化

    原理应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。材料与仪器DNA限制酶缓冲液电泳仪步骤1. 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DN

    2024-05-22 30
  • 随即寡核苷酸引物介导(大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验)

    随即寡核苷酸引物介导(大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验)

    原理此法是一种用以产生高放射比活、放射标记均匀分布的04八片段的切口平移方法。材料与仪器DNATE dNTP水浴锅步骤1. 用合适的限制性内切酶消化DNA,D

    2024-05-22 32
  • 修复突出的3’或5‘末端(大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验)

    修复突出的3’或5‘末端(大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验)

    材料与仪器DNA限制性内切酶 EDTA水浴锅步骤1. 在20 μl 反应体积中,用限制性内切酶消化0.1~4 μg DNA。2. 加入1 μl 0.5 mm

    2024-05-22 37
  • 标记DNA的3‘末端(大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验)

    标记DNA的3‘末端(大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验)

    原理选用本方法可产生用于放射自显影的32P末端标记分子量标志物。放射自显影带的强度与片段长度无关,标记DNA可稳定数月之久。 材料与仪器DNAdNTP水浴锅步骤

    2024-05-22 37
  • T4 DNA聚合酶

    T4 DNA聚合酶

    材料与仪器DNATrish·Cl dNTP MgCl2 BSA DTT水浴锅步骤一、50 μl 反应体积:(1)50 mmol/l Tris·Cl,pH8.0

    2024-05-22 32
  • 聚合酶链反应构建重组 DNA基本方案

    聚合酶链反应构建重组 DNA基本方案

    原理利用聚合酶链式反应(PCR),任何两个DNA片段可连接成一个新的重组DNA分子。通过在PCR引物中引入的额外非同源的核苷酸,可在连接处产生所需要的读码框架或

    2024-05-22 71