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多种酶消化
原理应用遗传学技术构建能显示基因以及其他序列待征在基因组上位置的图。材料与仪器DNA限制酶缓冲液电泳仪步骤1. 用低频率切割的不同限制性内切酶分别完全消化DN
2024-05-22 60 -
随即寡核苷酸引物介导（大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验）
原理此法是一种用以产生高放射比活、放射标记均匀分布的04八片段的切口平移方法。材料与仪器DNATE dNTP水浴锅步骤1. 用合适的限制性内切酶消化DNA，D
2024-05-22 52 -
修复突出的3’或5‘末端（大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验）
材料与仪器DNA限制性内切酶 EDTA水浴锅步骤1. 在20 μl 反应体积中，用限制性内切酶消化0.1~4 μg DNA。2. 加入1 μl 0.5 mm
2024-05-22 60 -
标记DNA的3‘末端（大肠杆菌 DNA 聚合酶 Ⅰ Klenow 片段实验）
原理选用本方法可产生用于放射自显影的32P末端标记分子量标志物。放射自显影带的强度与片段长度无关，标记DNA可稳定数月之久。 材料与仪器DNAdNTP水浴锅步骤
2024-05-22 61 -
T4 DNA聚合酶
材料与仪器DNATrish·Cl dNTP MgCl2 BSA DTT水浴锅步骤一、50 μl 反应体积：（1）50 mmol/l Tris·Cl，pH8.0
2024-05-22 80 -
聚合酶链反应构建重组 DNA基本方案
原理利用聚合酶链式反应（PCR），任何两个DNA片段可连接成一个新的重组DNA分子。通过在PCR引物中引入的额外非同源的核苷酸，可在连接处产生所需要的读码框架或
2024-05-22 94 -
放射性同位素标记的DNA序列测定分析
原理使用一种单链的DNA 模板或经变性的双链DNA 模板和一种恰当的DNA 合成引物。DNA 聚合酶利用单链的DNA 模板，合成出准确互补链，在合成时，某种dN
2024-05-22 52 -
高地辛标记的 DNA 探针制备实验基本方案
材料与仪器DNAdTTP dUTP EDTA SDS水浴锅 培养箱步骤1. 建立一个标准100 μl 反应体系，用10 μl，10地高辛·11-dUTP/dT
2024-05-22 71 -
基因转染(磷酸钙-DNA共沉淀法)
原理核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时，可使DNA 附在细胞表面，利于细胞吞入摄取，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA 仅有1
2024-05-22 74 -
化学法测定DNA的含量——二苯胺显色法
原理DNA 在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊
2024-05-22 123 -
SSR标记实验步骤
原理与其它分子标记相比，SSR标记具有以下优点：(1)数量丰富，覆盖整个基因组，揭示的多态性高；(2)具有多等位基因的特性，提供的信息量高；(3)以 孟德尔方式
2024-05-22 86 -
冻融法回收DNA片段
原理冻融法是指采用反复冷冻与融化时由于细胞中形成了冰晶及剩余液体中盐浓度的增高可以使细胞破裂。这种方法简单方便，但要注意那些对温度变化敏感的蛋白质不宜采用此法。
2024-05-22 81 -
水溶液中杂交（DNA 片段探针的应用实验）
材料与仪器DNA杂交液 洗膜液培养箱步骤1. 除了于65℃在杂交液Ⅰ中温育的条件外，预杂交按甲酰胺法进行。 2. 按甲酰胺法制备探针并用2 ml 杂交液Ⅰ稀
2024-05-22 56 -
甲酰胺法（DNA 片段探针的应用实验）
材料与仪器DNA杂交液 洗膜液注射器 超声仪 水浴锅步骤1. 用5~20 ml 杂交液Ⅰ依次浸泡10~20张硝酸纤维素滤膜。滤膜装入杂交袋中，加入足够的杂交液
2024-05-22 73 -
制备YAC DNA进行Southern印迹分析
材料与仪器酵母菌AHC SCE SCEM Tris·Cl EDTA TE 乙酸甲 RNase A 异丙醇 NaCl培养箱 离心管 转子步骤1. 接种一个红色的
2024-05-22 52
