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M13噬菌体双链（复制型）DNA的制备
原理感染 M13 噬菌体的细菌含病毒双链 RF DNA，培养基中粗提病毒颗粒中含单链子代 DNA，双链 RF DNA 可以采用类似于质粒纯化的方法从感染细胞的小
2024-05-21 76 -
M13噬菌体液体培养
原理M13 噬菌体原种通常采用液体培养，感染细胞并不裂解而是缓慢生长形成稀悬液。接种几乎总是用一个新挑取的噬菌斑或单个噬菌斑获得的噬菌体颗粒悬液。感染细胞含 2
2024-05-21 65 -
P1噬菌体及其克隆系统的应用
原理P1 噬菌体与 λ 噬菌体同年被发现（Bertani 1951)。两种噬菌体在天然宿主中都是温和噬菌体，它们在实验室的研究历程也几乎相同。λ 噬菌体一经被发
2024-05-21 71 -
M13 噬菌体铺平板
原理M13 噬菌斑是由单个病毒感染单个细菌后形成的。子代病毒颗粒感染邻近细菌, 然后又产生下一代病毒颗粒，细菌在半固体培养基（如含琼脂或琼脂糖）上生长时，子代病
2024-05-21 79 -
λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验
原理如本方案所述，λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说，λ 噬菌体
2024-05-21 61 -
噬菌体DNA在滤膜上的杂交实验
原理通过用 32P 标记探针的原位杂交，可筛选携带有固定化 DNA 的滤膜，这些 DNA 来源于噬菌斑。该技术是强有力的、高度特异的和很灵敏的，能从数千个噬菌斑
2024-05-21 65 -
噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
原理一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法，在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法，包
2024-05-21 78 -
λ噬菌体臂与外源基因组DNA片段的连接实验
原理当 λ 噬菌体臂与外源基因组 DNA 片段相连时，必须考虑到两个参数：噬菌体臂与潜在插入片段的摩尔比，以及在反应混合物中各类 DNA 的浓度。材料与仪器噬菌
2024-05-21 59 -
CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器十六烷基溴化吡啶 EDTA-Tris EDTA-Tris-DNA 溶液 乙醇-乙酸钠溶液 乙醇 乙酸钠 TE(pH7.6) 或适当的预杂交液 核酸和寡
2024-05-21 66 -
寡核苷酸5'末端磷酸化实验
材料与仪器T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 Tris-Cl T4噬菌体多核苷酸激酶 寡核苷酸 [γ-32P]ATP微量离心管 水浴箱步骤材料缓冲液与溶液稀释贮存液至
2024-05-21 61 -
琼脂糖凝胶中DNA的检测
原理琼脂糖凝胶中的核酸通过染色，可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法：溴化乙锭（ethidium bromide, E
2024-05-21 92 -
高容量载体中基因组DNA片段末端的分离(小载体PCR)
原理许多真核生物的基因所包含的 DNA，远非单个重组子所能容纳得了的。对于大多数染色体来说，更是如此。因此，必须构建一套重叠的 DNA 克隆，这些克隆的 DNA
2024-05-21 49 -
菌落 PCR（大肠杆菌）
原理聚合酶链反应中循环开始前的预变性和 PCR 循环过程中的变性是在 94 ℃ 或 95 ℃ 的高温下进行的，该温度可使模板 DNA 变性、双链解开，实验发现该
2024-05-21 234 -
利用PCR分析酵母菌落
原理用 PCR 分析酵母菌落时，无需纯化 DNA。本方案以单个酵母菌落的粗裂解液作为 PCR 扩增的模板，来确定酵母中是否携带目的 DNA 序列。 材料与仪器T
2024-05-21 97 -
酵母DNA的小量制备
原理通过消化细胞壁，然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性
2024-05-21 55
