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分子克隆实操技术
材料与仪器目的 DNA 或者 cDNA引物（带有酶切位点和保护碱基等）PCR 试剂、载体质粒、限制性内切酶琼脂糖、DNA 琼脂糖凝胶回收试剂盒T4 DNA 连接
2024-05-17 35 -
Gateway 克隆（入门载体的构建）
简介Gateway 克隆属于高效大规模克隆系统，是利用载体上一系列特殊的酶，可以高效、方便、快速地将不同 DNA 序列拼接在一起，将目的基因克隆到受体上用于重组
2024-05-17 61 -
Gateway 克隆（LR 反应）
简介Gateway 克隆属于高效大规模克隆系统，是利用载体上一系列特殊的酶，可以高效、方便、快速地将不同 DNA 序列拼接在一起，将目的基因克隆到受体上用于重组
2024-05-17 62 -
Gateway 克隆（BP 反应）
简介Gateway 克隆属于高效大规模克隆系统，是利用载体上一系列特殊的酶，可以高效、方便、快速地将不同 DNA 序列拼接在一起，将目的基因克隆到受体上用于重组
2024-05-17 66 -
TA 克隆
原理大部分耐热性 DNA 聚合酶在进行 PCR 反应时都会在 PCR 产物的 3’末端添加一个「A」，而T载体是两侧的 3’端添加了「T」的线性化载体，因此 P
2024-05-17 49 -
一步法克隆
简介一步法克隆是一种简单、快速和高效的克隆技术，现有许多一步法克隆试剂盒可以买到，它能够将扩增的 DNA 产物定向插入任何线性化载体的任何位点，线性化的载体和插
2024-05-17 43 -
粘性末端克隆
原理限制性内切酶能够识别并酶切双链 DNA 分子中的特定核苷酸序列，使目的 DNA 片段和载体产生不平齐的粘性末端，然后在 DNA 连接酶的作用下，将酶切后的目
2024-05-17 37 -
Topo 克隆
简介是一种基于转座子元件的 DNA 插入方法，适用于插入小片段的 DNA 序列（约为 4~5 kb）。原理TOPO 克隆技术是基于一个特殊的转座子序列—— pU
2024-05-17 41 -
SLIC 克隆
简介SLIC 克隆是一种基于 DNA 重组技术的克隆方法，通过利用外源 DNA 和目的 DNA 的线性化切片段相互衔接，使用序列无关的连接酶将它们连接起来，从而
2024-05-17 31 -
快速点突变分子克隆
简介利用一次 PCR 方法进行定点突变分子克隆，较盒式突变及其它传统方法更快速简便。原理PCR 原理: 在 DNA 聚合酶催化下，以母链 DNA 为模板，以特定
2024-05-17 26 -
酵母基因组 DNA 提取
简介首先利用含有离液盐的溶液裂解酵母，以确保大分子彻底变性。之后加入乙醇，裂解物离心通过微量离心管时，DNA 会结合到离心柱硅胶模上。在洗涤去除污染物后，将 D
2024-05-17 43 -
溴化乙锭法（DNA 浓度和纯度的测定）
原理溴化乙锭（EB）是一种嵌入型染料，其上的一个菲啶环可插入到 DNA 或 RNA 链的堆积碱基之间。溴化乙锭的嵌入基团与碱基的接近使二者紧密结合。DNA 吸收
2024-05-17 37 -
PCR 反应体系与反应条件、Taq 酶的选择、循环参数的设定
原理聚合酶链反应（Polymerase chain reaction, PCR）是一种在体外快速扩增特定基因或 DNA 序列的方法。双链 DNA 分子在临近沸点
2024-05-17 36 -
试剂分装流程
试剂分装的一般流程：1. 准备工作：清洁环境：在无菌条件下操作，提前对分装区域进行清洁和消毒，确保无尘、无菌、无污染。个人防护：佩戴实验服、手套、口罩、护目镜等
2024-05-17 891 -
反转录 RT-PCR 实验流程
原理一、总 RNA 的提取见总 RNA 的提取相关内容。二、cDNA 第一链的合成目前试剂公司有多种 cDNA 第一链试剂盒出售，其原理基本相同，但操作步骤不一
2024-05-17 67
