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痘苗 DNA 检测实验斑点杂交法
材料与仪器贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞 重组病毒噬斑悬液NaOH Tris • Cl 2SSC PBS 胰酶/EDTA 干冰/
2024-05-20 54 -
痘苗 DNA 检测实验PCR 法
原理材料与仪器贴壁生长良好的单层 BS-C-1 或 HuTK-143B 细胞 重组病毒噬斑悬液PBS 胰酶/EDTA 干冰/乙醇 DNA 提取缓冲液 乙酸钠 乙
2024-05-20 79 -
痘苗病毒 DNA 提取实验基本方案
材料与仪器纯化的痘苗病毒Tris•Cl 溶液 SDS 蔗糖溶液 蛋白酶 K 用 50 mmol/L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚 1:1苯酚氯仿 1 mo
2024-05-20 57 -
DNA琼脂糖凝胶电泳
原理利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场中向正极移动,且相同数量的双链DN
2024-05-18 86 -
部分消化
原理有时需要得到仅在DNA片段的内部存在的部分限制性位点切割产生DNA,这在用待克隆片段内部存在的限制酶切位点进行克隆和构建酶切图谱时特别有用。材料与仪器DNA
2024-05-18 49 -
消化多个DNA
原理当消化多个样品时,以下方案可减少取吸次数,节省时间和减少污染的机会。材料与仪器DNA步骤1. 分别加入相同体积的各个样品DNA至不同微量离心管中。 为避免
2024-05-18 67 -
单酶单DNA样品消化
原理限制性内切酶种类虽然很多 , 但反应条件都十分相似 。一般需要较纯的底物DNA、Mg2+、Tris-HCl 缓冲液, 通常在37℃保温以酶解DNA 。材料与
2024-05-18 71 -
按大小分离RNA:在含有甲醛的琼脂糖凝胶上进行的RNA的电泳
原理RNA 样品经甲酰胺处理以及经含有甲醛的凝胶电泳分离可能会发生变性,这一方法是从 Lehrachetal. (1977), Goldberg (1980),
2024-05-18 62 -
DNA 体外重组
简介DNA 体外重组,又称基因克隆,是基因操作中最基本的技术,也是分子生物学的核心技术。DNA 体外重组包括:欲进行重组的 DNA 片段(常称为目的 DNA)
2024-05-18 89 -
自动激光荧光 DNA 测序
简介目前,自动激光荧光 DNA 测序技术(又称第一代测序技术)的应用已十分普遍。自动激光荧光DNA测序的基本原理均基于Sanger双脱氧法,但不同的自动激光荧光
2024-05-18 64 -
焦磷酸测序
简介焦磷酸测序 (pyrosequencing) 是一种基于发光法测定焦磷酸 (PPi) 的测序技术。焦磷酸测序技术的三个关键点分别是:①反应中使用 dATP
2024-05-18 56 -
利用ENU诱变模式生物基因组
简介乙酰基亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)是目前最常用的小鼠诱变剂,它是一种烷化剂,可以将其乙烷基转移到 DNA 碱基的氧原子或氮
2024-05-18 121 -
piggyBac转座子系统诱变基因组
简介转座子(transposon)是一类可在基因组中发生位置移动的 DNA 片段,其移动过程被称为转座(transposition)。根据转座机制的不同,转座子
2024-05-18 87 -
SB转座子系统诱变基因组
简介转座子(transposon)是一类可在基因组中发生位置移动的 DNA 片段,其移动过程被称为转座(transposition)。根据转座机制的不同,转座子
2024-05-18 63 -
细胞原位杂交法(固相杂交-荧光原位杂交法)
简介荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)中的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用核素标
2024-05-18 65