-
什么是实时荧光定量PCR?
实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量
-
荧光定量PCR实验操作步骤
荧光定量PCR第一步:RNA提取1、首先进行不同样本的预处理:(1)组织样本:迅速将新鲜的组织切成合适的大小,在液氮中充分研磨后加裂解液裂解,或直接加入裂解液后
-
荧光定量PCR结果分析解读
1、基线基线是指实时PCR反应的基线是指在PCR的初始循环期间的信号水平,通常是3至15的循环之间,此时荧光信号几乎没有变化。此时低信号可以认为是背景或反应的“
-
荧光定量PCR实操注意事项
1、荧光定量PCR操作注意点:(1)实验室注意分区:试剂准备间,样本处理间,PCR室,电泳间要有明确区分,各房间实验室的实验服不得混用;(2)试剂准备间及样本处
-
实时荧光定量PCR常见问题及解决方法
1、RNA得率低原因1:样品裂解不完全解决:适当选择起始材料的量,加入合适体积的裂解液。原因2:匀浆不充分解决:减少材料的数量;根据材料类型选择合适匀浆方法;组
-
实时荧光定量PCR实验技术答疑
1、实时荧光定量技术是什么?有什么用? 实时荧光定量PCR技术(Real-time qPCR),其基本原理是在常规PCR基础上添加荧光染料或荧光染料探针,
-
什么是SNP/单核苷酸多态性?
单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人
-
SNP/单核苷酸多态性检测最常用的三种方法
1、Taqman探针法(定性)针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告
-
SNP检测方法总结
SNP标记具有很大的发展潜力,被广泛应用于生物、农学、医学、生物进化等众多领域,在分子遗传学、药物遗传学、法医学以及疾病的诊断和治疗等方面发挥着重要作用,现在我
-
Taqman探针法检测SNP分型详解
Taqman探针法将样品与反应组分在封闭的体系中进行简单混合,通过检测PCR反应过程中的荧光变化,可以实时检测SNP位点的基因分型。由于无需任何PCR之后的操作
-
直接测序法检测SNP详解——最常用的方法
一、样本基因组DNA的提取1.取50 mL血样于离心管中,加PBS缓冲液至1.5 mL,轻轻地摇匀。冷冻离心机6500 rpm离心10 min,去掉上清液,保留
-
SNP检测常见问题答疑上篇
问题一:什么是SNP? 答:老生常谈了,但首先还是要把概念弄清楚。单核苷酸多态性,也就是我们简称的SNP,主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的
-
SNP检测常见问题答疑下篇
问题一:SNP的研究思路是怎样的?答:首先寻找研究相关的SNP位点(1)如果是单基因遗传,特别是罕见遗传的疾病,可以通过外显子测序对一个家系的几个个体进行测序,
-
什么是血管生成实验?
血管生成(Angiogenesis)是指从已有的毛细血管或毛细血管后静脉发展而形成新的血管,主要包括:激活期血管基底膜降解;血管内皮细胞的激活、增殖、迁移;重建
-
血管生成实验操作步骤
一、准备基质胶1.实验前一天将Matrigel置于冰盒中,放入4C冰箱,使胶能过夜缓慢融化。(注意:同样要准备一些4。C预冷的枪头用于吸取Matrigel)2.