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免疫技术

微量补体结合反应(以钩端螺旋体病为例)

2025-05-14 免疫技术 加入收藏
本试验采取热法血清稀释法。每滴相当于0.02ml,总量为6滴,相当于0.12ml。一、材料1、抗原 系各型菌株培养物多价抗原,按瓶签说明倍数稀释;2、溶血素 正

本试验采取热法血清稀释法。每滴相当于0.02ml,总量为6滴,相当于0.12ml。

一、材料

1、抗原 系各型菌株培养物多价抗原,按瓶签说明倍数稀释;

2、溶血素 正式试验时使用2个工作单位;

3、补体系冻干补体 用灭菌生理盐水作1:5基础稀释。在溶血素效价测定和补体效价滴定时均作1:60稀释,在正式试验时,用2个工作单位;

4、1%的红血球悬液 用灭菌生理盐水洗涤与配制。在使用时与等量含2个工作单位的溶血素液配成致敏红血球悬液;

5、阳性血清 正式试验时1:100稀释;

6、阴性血清 正式试验时1:10稀释;

7、生理盐水。

二、预实验

1、溶血素效价测定 用小试管做时,单位为ml;用血清稀释板做时,单位为滴。

(1)溶血素稀释

先将溶血素做1:1000基础稀释。见表1。

表1 溶血素稀释表(单位:滴)

稀释度1:10001:20001:30001:40001:50001:60001:70001:8000

生理盐水

——1234567
1:1000溶血素11111111

(2)溶血素效价测定

见表2。

表2 溶血素效价测定表(单位:滴)


1:10001:20001:30001:40001:50001:60001:70001:8000
溶血素11111111
1:60补体22222222
生理盐水22222222
1%红血球悬液11111111
置微型振荡器震荡3-5min后,放37℃水浴10min







溶血程度举例#####+++

根据上述结果,溶血素效价为1:5000即为一个工作单位,2个工作单位溶血素为1:2500稀释度。


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