HLA等位基因序列特异性探针（SSO）及其标记
HLA 等位基因序列特异性探针（SSO）及其标记 （一）DRB1分型SSO探针 根据分辨率的要求选择。 常用的DRB1分型的SSO探针见表
| 代号 | SSO探针的DNA序列（5’-3’） | DR特异性 |
| L11 | TTCAAACTTAAGCTGCCAC | DR1 |
| D11 | CTCATACTTATCCTGCTGC | DR2 |
| N77 | TCTGCAGTAGTTGTCCACC | DR3 |
| H33 | CTCTTGGTGATAGAAGTATC | DR4 |
| E58 | CCAGTACTCCTCATCAGGC | DR11 |
| L37 | AGCGCAGGAGCTCCTCCTG | DR12 |
| G11 | CTTATACTTACCCTGCCAC | DR7 |
| L74 | GTGTCCACCAGGGCCCGCC | DR8（+1403） |
| Y26 | CTGTGCAGATACCGCACCC | DR9 |
| V11 | CTCAAACTTAACCTCCTCC | DR10 |
| E71 | GGCCCGCTCGTCTTCCAGG | DR13（1301，1302，1304） |
| DR1（0103） | ||
| DR4（0402，0414） | ||
| DR11（1102，1103） | ||
| K71 | CGGCCCGCTTGTCTTCCAG | DR13-HAG（1303） |
| H60 | GTTCCAGTGCTCCGCAGCA | DR14（1401，1404，1407） |
| N37 | AGCGCACGTTCTCCTCCTG | DR3 |
| DR13（1301，02，04，06） | ||
| DR14（1402，1403，1406） | ||
| D37 | GAAGCGCAAGTCCTCCTCT | DR2（DRB5*0101） |
| AV86 | GCTCTCCACAGCCCCGTAG | DR2（DRB5*02） |
| DR1（0102） | ||
| DR12 |
（二）SSO探针标记 SSO探针标记可以采用放射性同位素标记，也可采用非同位素表记。下面介绍的是采用T4噬菌体多核苷酸激酶将放射性同位素γ-32 P标记在SSO探针上。 【试剂配制】 （1） SSO探针（10pmol/L） （2） 10XT4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液：0.5mol/LTris-HCl（pH7.6）；0.1mmol/L MgCl2；50mmol/L二巯苏糖醇（DTT）；1mmol/L盐酸亚精胺；1mmol/L EDTA（pH8.0） （3）[γ-32 P]ATP（比活5000Ci/mmol，10mCi/ml水溶液） （4）T4噬菌体多核苷酸激酶 【操作步骤】 （1）配制标记反应混合液 SSO探针（10pmol/L） 1.0ul 10XT4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 2.0ul [γ-32 P]ATP 5.0ul ddH2 O 11.4ul （3） 在上述反应混合液中加入8单位（约1ul）T4噬菌体多核苷酸激酶，充分混匀，置37℃温育45分钟； （4） 温育完毕后，置68℃10分钟，灭活T4噬菌体多核苷酸激酶。 【注意事项】 （1） 标记后的SSO探针比活应达到2000Ci/mmol，如果比活性太低，可在标记反应中补加8单位T4噬菌体多核苷酸激酶继续标记。 （2） 上述标记的SSO探针可直接使用，也可以采用柱层析分离后使用。 （3） 放射性物质的操作应严格遵守有关规定和采取适当的防护措施。
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