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RAPD（随机扩增多态性DNA）分析技术
原理RAPD作为单引物的PCR扩增产物，其产生机理是引物首先结合到模板链，沿模板5'端方向延伸而产生不同长度的DNA片段，然后以这些片段为模板继续大量扩
2024-06-13 67 -
质粒DNA的限制性内切酶酶切分析
简介实验目的学习和掌握限制性内切酶的特性掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。相关基础知识限制性核酸内切酶
2024-06-13 81 -
酶切实验
原理采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单，但双酶切如果两种酶所用缓
2024-06-13 81 -
甲醛洋菜胶体电泳
原理rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后，呈现于胶体上的两个主要RNA色带应该分别是large 与small r
2024-06-13 56 -
单核苷酸多态性（SNP）实验基本方案
原理由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性(Polymorphism)。据估计，在人类基因组中，大约每千个碱基中有一个SNP，无论是比较于限制性片段长度多态性
2024-06-13 82 -
凝胶迁移实验（EMSA）（凝胶迁移）
原理一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的
2024-06-13 99 -
变性梯度凝胶电泳(DGGE)
原理1. 变性梯度凝胶电泳（DGGE）是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链，称之为变性。核酸50%发生变性时
2024-06-13 68 -
原位杂交实验要求及步骤
原理根据探针的标记物是否直接被检测，原位杂交又可分为直接法和间接法两类。直接法主要用放射性同位素、荧光及某些酶标记的探针与靶核酸进行杂交，杂交后分别通过放射自显
2024-06-13 64 -
DNA 序列分析技术
原理本节描述运用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自动DNA 测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Bios
2024-06-13 70 -
质粒的制备（构建载体）
原理在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开，而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调至中性并有高盐
2024-06-13 55 -
测定用乙醇固定的 DNA 的含量
原理DNA和RNA在260nm处有一很高的吸收峰，利用这个原理我们测其OD260，再推算出其浓度。材料与仪器细胞样品PBS缓冲液 70%乙醇 PI液离心机 恒温
2024-06-13 59 -
基因克隆：高效感受态细胞制作
原理主要原理是通过电击法或CaCl2、RbCl(KCl)等化学试剂处理，使细胞膜的通透性发生暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。因RbCl法
2024-06-13 74 -
目的基因的亚克隆
原理亚克隆的基本过程包括：(1)目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。材料与仪器E.coli J
2024-06-13 66 -
重组质粒的连接、转化及筛选
原理用特定的限制性内切酶切割载体DNA和外源DNA片段并进行纯化，于体外使两者相连接(若用T-载体，可直接用纯化的PCR产物进行连接)，转化宿主细菌后，利用蓝白
2024-06-13 67 -
转染细胞的稳定筛选实验
原理外源基因转染真核细胞后整合入基因组DNA，能够长期存在于细胞中，随染色体复制而传给子代。外源基因进入培养细胞一般要经过几天才能够整合入基因组DNA。材料与仪
2024-06-13 69
