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亚硫酸氢盐修饰后测序法检测甲基化(DNA甲基化)
原理重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变,用PCR扩增(引物设计时尽量避免有CpG,以免受甲基化因素的影响)所需
2024-06-13 75 -
多药抗药基因的表达实验(PCR扩增法)
原理大多MDR细胞膜上出现MDR-1基因及其基因产物P-糖蛋白过度表达。 多药抗药基因的表达实验是通过反转录和PCR的方法来检测这些特定基因的过度表达。材料与仪
2024-06-13 78 -
核酸纯度、浓度与分子量测定实验(Ethidium bromide染色法)
原理利用一系列不同浓度的DNA标准溶液(0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml),或已知浓度的DNA marker,和未知浓度DNA样品一起进
2024-06-13 109 -
核酸纯度、浓度与分子量测定实验(紫外分光光度法)
原理溴化乙锭是一种荧光染料,在凝胶电泳中,EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间,在紫外线激发下发出荧光,其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm
2024-06-13 79 -
微生物液体培养实验(细菌培养的检测)
材料与仪器细菌显微镜 玻片 盖玻片 滴管步骤一、利用计数板检测 1. 用一片干净的盖玻片盖住一片干净的计数玻片或者petraff-Hausser小室,参见下面
2024-06-13 62 -
微生物液体培养实验(大体积培养法)
材料与仪器细菌胰化蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 NaOH接种针 培养瓶 摇床步骤1. 按1:100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中,烧瓶的体积应该是培养液
2024-06-13 58 -
微生物液体培养实验(过夜培养法)
材料与仪器细菌胰化蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 NaOH接种针 培养瓶 摇床步骤1. 取5 ml 液体培养基加入一支无菌的16 mm 或18 mm 的培养试管中
2024-06-13 85 -
微生物固体培养实验(涂布法)
材料与仪器细菌涂布棒 培养箱 培养皿步骤一、实验准备 1. 涂布棒 (1)加热并弯曲一支直径4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制备涂布棒。(2)灭菌,将涂布棒的三
2024-06-13 62 -
微生物固体培养实验(平板划线法)
材料与仪器细菌接种环 培养皿步骤一、实验准备 1. 接种环 (1)灭菌,将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。 (2)冷却,将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至
2024-06-13 83 -
微生物固体培养实验(连续稀释法)
材料与仪器细菌胰化蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 NaOH培养瓶 玻璃棒 离心管 摇床步骤1. 在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液,并标上序号1、2、
2024-06-13 61 -
脉冲场凝胶电泳实验(倒转电场)
材料与仪器DNAGTBE TBE 琼脂糖电泳仪步骤1. 制备用于水平电泳的1%琼脂糖凝胶,放入电泳装置,其上覆盖以2~3 mm 的GTBE或TBE缓冲液。 2
2024-06-13 60 -
筛分型琼脂糖凝胶电泳实验(电泳实验)
材料与仪器DNATAE 琼脂糖电泳仪步骤1. 在TAE电泳缓冲液中熔化3%~5%低熔点筛分型琼脂糖。将胶倒入普通琼脂糖凝胶装置中。2. 与普通琼脂糖凝胶一样
2024-06-13 51 -
Southern 印迹实验(电转印法)
原理因为聚丙烯酰胺凝胶的扎径太小,DNA不能在其横截面上有效地扩散,毛细管转移法不适用DNA从聚丙烯酰胺凝胶的转移。因此,聚丙烯酰胺凝晈必须在低离子强度的缓冲液
2024-06-13 65 -
Southern 印迹实验(向下毛细管转移法)
原理向上毛细管转移法的一个缺点是凝胶可能被加于其上面的加有重物的滤纸层和纸巾塔压紧,从而降低毛细管作用。材料与仪器DNASSC转移塔 滤纸步骤一、实验步骤1.
2024-06-13 56 -
Southern 印迹实验(碱性缓冲液法)
原理用带正电荷的尼龙膜时,如果用碱性转移缓冲液,则转移的DNA可共价结合于膜上。材料与仪器DNANaOH NaCl电泳仪步骤1. 印迹法中步骤1和歩骤2中所述
2024-06-13 68