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噬菌体DNA从噬菌斑到滤膜的转移实验
原理一个从 λ 噬菌体文库中鉴别和分离特异重组子的方法，在分子克隆历史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起来。这个目前仍经常使用的方法，包
2024-05-21 42 -
λ噬菌体臂与外源基因组DNA片段的连接实验
原理当 λ 噬菌体臂与外源基因组 DNA 片段相连时，必须考虑到两个参数：噬菌体臂与潜在插入片段的摩尔比，以及在反应混合物中各类 DNA 的浓度。材料与仪器噬菌
2024-05-21 29 -
CPB沉淀法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
材料与仪器十六烷基溴化吡啶 EDTA-Tris EDTA-Tris-DNA 溶液 乙醇-乙酸钠溶液 乙醇 乙酸钠 TE(pH7.6) 或适当的预杂交液 核酸和寡
2024-05-21 43 -
寡核苷酸5'末端磷酸化实验
材料与仪器T4噬菌体多核苷酸激酶缓冲液 Tris-Cl T4噬菌体多核苷酸激酶 寡核苷酸 [γ-32P]ATP微量离心管 水浴箱步骤材料缓冲液与溶液稀释贮存液至
2024-05-21 31 -
琼脂糖凝胶中DNA的检测
原理琼脂糖凝胶中的核酸通过染色，可以在波长为 300 nm 的紫外灯下检测。介绍琼脂糖凝胶中核酸染色的两种方法：溴化乙锭（ethidium bromide, E
2024-05-21 54 -
高容量载体中基因组DNA片段末端的分离(小载体PCR)
原理许多真核生物的基因所包含的 DNA，远非单个重组子所能容纳得了的。对于大多数染色体来说，更是如此。因此，必须构建一套重叠的 DNA 克隆，这些克隆的 DNA
2024-05-21 28 -
菌落 PCR（大肠杆菌）
原理聚合酶链反应中循环开始前的预变性和 PCR 循环过程中的变性是在 94 ℃ 或 95 ℃ 的高温下进行的，该温度可使模板 DNA 变性、双链解开，实验发现该
2024-05-21 51 -
利用PCR分析酵母菌落
原理用 PCR 分析酵母菌落时，无需纯化 DNA。本方案以单个酵母菌落的粗裂解液作为 PCR 扩增的模板，来确定酵母中是否携带目的 DNA 序列。 材料与仪器T
2024-05-21 50 -
酵母DNA的小量制备
原理通过消化细胞壁，然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性
2024-05-21 34 -
酿酒酵母的生长及其DNA的制备
原理用这一方法制备的 DNA 适用于琼脂糖凝胶电泳、Southern 印迹、亚克隆、基因组文库构建、PCR 或其他不需要完整的高分子质量 DNA 的方法。材料与
2024-05-21 26 -
阴离子交换色谱纯化从琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶回收的DNA
原理从琼脂糖凝胶中回收的 DNA 片段，如 PCR 产物或酶切 DNA 片段，对进一步酶切具有一定的抗性。这种抗性产生的原因是多方面的，通常将其归为抑制剂的存在
2024-05-21 40 -
低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收（有机溶剂抽提）
原理羟乙基修饰的琼脂糖可降低链间的氢键数目，并可在比标准琼脂糖更低的温度下熔化和凝固。多糖链上这种替换发生的程度决定了琼脂糖熔化与凝结的确切温度。这 一特性构成
2024-05-21 32 -
从鼠尾或其他小样本中制备基因组DNA
原理这一简单的实验方案在成百上千的实验室被广泛应用于转基因或基因剔除小鼠的基因型鉴定以及从小量培养的细胞或组织块中提取 DNA。材料与仪器蛋白酶 K 培养的细胞
2024-05-21 34 -
细胞攻略——CT26.WT(小鼠结肠癌细胞)培养教程
--细 胞 基 本 信 息---细胞名称： CT26.WT(小鼠结肠癌细胞)细胞别称： CT26WT细胞货号： SNL-117生长特性： 贴壁培养条件： 164
2024-05-21 601 -
细胞攻略——LLC(小鼠肺癌细胞)培养教程
--细 胞 基 本 信 息---细胞名称： LLC(小鼠肺癌细胞)细胞别称： LL/2 (LLC1); LL/2 (LLc1); LL/2(LLc1); LL/
2024-05-21 655
