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从免疫亲和层析柱上洗脱抗原方法
【准备工作】 此步骤最大的难点是确定恰当的洗脱条件。为了获得一个清晰的洗脱峰和较纯的抗原,需要花费大量的时间进行试验和调整洗脱条件。 【溶液和特别设备】 (1)
2025-05-28 15 -
荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合(标记) 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法: ⑴ 透析法:①适用于蛋白质含
2025-05-28 16 -
抑制B淋巴细胞瘤生长的嵌合抗CD20基因工程抗体
【摘要】目的 构建抗CD20嵌合抗体Fab'和F(ab)2片段表达载体,并在大肠杆菌中进行高效可溶性分泌表达,比较二者的活性差异。方法 从相应的杂交瘤中
2025-05-28 15 -
微型双功能抗体抗CD3/抗Pgp的构建和表达
【摘要】目的 构建和表达抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体,并测定该微型双功能抗体的生物学活性。方法 采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗CD2
2025-05-28 15 -
免疫金银染色法(immunogold-silver taining,IGSS)
【基本原理】免疫金银染色法是利用银显影液,胶体金颗粒起着液化作用,使显影液中的银离子在还原剂(对苯二酚)存在情况下被还原成银原子,在金颗粒周围形成一个“银壳”,
2025-05-28 25 -
酶标抗体和酶-抗酶复合物的应用于免疫酶组化技术(APAAP法)
【基本原理】碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色法(APAAP法),是一种免疫组化技术。用兔抗鼠IgG起搭桥作用,其中一个Fab段连接McAb ,另一个Fab段连
2025-05-28 14 -
彩色免疫金银染色法
【基本原理】 彩色免疫金银染色法是抗原位点处生成的银颗粒经铁氰化钾与溴化钾的作用被氧化成溴化银,后者与彩色显影剂反应被还原成金属银,而彩色显影剂本身则被
2025-05-28 13 -
BA-Spot-ELISA法检测抗体形成细胞
[试剂及配制](1)包被液(pH9.6碳酸盐缓冲液)Na2CO3 0.16g NaHCO3 0.29g 蒸馏水加至100ml(2)洗涤液(pH7.4PBS-Tw
2025-05-28 14 -
聚蔗糖-泛影葡胺法分离嗜碱性粒细胞
[试剂及配制](1)聚蔗糖-泛影葡胺分层(D=1.085)(2)HEPES-ACM缓冲液:HEPES25mmol/L中含CaCl21mmol、NaCl130mm
2025-05-28 15 -
单向混合淋巴细胞培养
[试剂及材料](1)供者和受者淋巴细胞悬液:浓度调至1106/ml。(2)丝裂霉素C:用培养液或PBS配制300μg/ml。(3)含20%NCS的RPMI-16
2025-05-28 14 -
平衡法选择高亲和力噬菌体抗体
[器材和试剂]● 链霉亲和素磁珠(DynabeadsM280,Dynal)● 磁性1.5ml试管架(Dynal)● 磷酸盐缓冲液(PBS)● 2%脱脂奶
2025-05-28 13 -
创建重链改组噬菌体文库
[器材和试剂]● PCR试剂和设备● 含有起始scFv的pHENl质粒或单链DNA(ssDNA)● Wlzard PCR纯化试剂盒(PrOli]egs.)
2025-05-28 12 -
创建轻链改组噬菌体文库
[器材和试剂]● PCR试剂和设备● 含有起始scFV基因的载体pHENl单链模板DNA(50ng/ul)● Geneclean试剂盒● Wlzard
2025-05-28 13 -
人VL基因文库的构建
[器材和试剂]● PCR试剂和设备● cFv基因文库单链模板DNA,制备自pHENl中的天然scFv文库(10ng/u1)● Gelleclean试剂盒(
2025-05-28 15 -
XTT比色法
[基本原理]XTT比色法有Scudiero等首次采用,用于检测细胞增殖。XTT是异种与MTT类似的四唑氮衍生物,可被活细胞线粒体脱氢酶还原成水溶性的棕色甲肷产物
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